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超薄切片(透射电镜)是使用超薄切片机将树脂包埋的样本进行切片,切片厚度一般为50-80nm左右,用无碳芳华膜铜网进行捞片,然后重金属染色,常温干燥保存
树脂包埋(透射电镜)实验步骤:1、取材:电镜取材非常严格,取材过程中速度要快,5分钟内要将组织取出放入固定液中;取材组织块要小,一般要求将组织切成1立方毫米大小;取材部位要准确、取材温度要低是在4℃条件下进行;取材工具要干净,锋利。如果是贴壁细胞不可用酶消化下来,先吸去培养液然后加入电镜固定液用橡胶块刮下细胞,离心,细胞体积保证绿豆大小即可,然后吸去上清更换固定液继续固定。
透射电镜全套,透射电镜制片步骤1、 取材固定:新鲜组织确定取材部位,尽量减小牵拉、挫伤与挤压等机械损伤,组织体积一般不超过1mm×1mm×1mm ,迅速投入电镜固定液4℃固定2-4h。细胞离心至管底可以看到绿豆大小的细胞团块,弃去培养液加入电镜固定液4℃固定2-4h。0.1M磷酸缓冲液PBS(PH7.4)漂洗3次,每次15min。