没食子酸含量检测--高效液相

没食子酸又名五倍子酸，是一种有机酸，多酚类有机物。名称为3,4,5-三羟基苯甲酸，化学式为C7H6O5。它广泛存在于五倍子、漆树、掌叶大黄、大叶桉、山茱萸等植物中。没食子酸易溶于水、醇和醚；具有酚及羧酸的性质。制备方法有酸水解法、碱水解法、发酵法、酶法等，在制药、墨水、染料、食品、有机合成等方面有广泛的应用。没食子酸是中药材提取物，具有多种生物活性，比如抗炎、抗氧化、抑菌等作用。没食子酸与三价铁离子生成蓝黑色沉淀，是蓝黑墨水的原料。

高效液相色谱法（HPLC）是检测没食子酸含量的常用方法。

色谱条件：反相C18色谱柱，柱温25℃；以甲醇和0.5%的磷酸为流动相，流速0.8-1ml/min，进样量10-20ul；紫外检测器，波长273nm。确保具有良好的线性关系和回收率，标准偏差在规定的范围内。 样品制备：精密称量样品1g，置于50ml容量瓶中，加入30ml甲醇，超声1h。加入甲醇，定容到刻度，摇匀，过滤。 标准品制备：称取没食子酸标准品2mg，放入50ml容量瓶中，用甲醇定容到刻度，摇匀备用。 标准曲线制作：梯度稀释没食子酸标准品，至少6个点，分别用甲醇定容到刻度，摇匀。以上述的色谱条件，进样到hplc，测定色谱图，记录数据。以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，制作标准曲线，计算回归方程和回收率，确保具有良好的线性关系。 样品测定和计算：在色谱条件下，吸取样品样品溶液10ul，进样测定色谱峰面积。如果浓度过高，先稀释，再进样，确保峰面积在标准曲线范围内。根据回归方程和样品的色谱峰面积，可以计算出样品没食子酸的含量，考虑回收率。