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没食子酸又名五倍子酸,是一种有机酸,多酚类有机物。名称为3,4,5-三羟基苯甲酸,化学式为C7H6O5。它广泛存在于五倍子、漆树、掌叶大黄、大叶桉、山茱萸等植物中。没食子酸易溶于水、醇和醚;具有酚及羧酸的性质。制备方法有酸水解法、碱水解法、发酵法、酶法等,在制药、墨水、染料、食品、有机合成等方面有广泛的应用。没食子酸是中药材提取物,具有多种生物活性,比如抗炎、抗氧化、抑菌等作用。没食子酸与三价铁离子生成蓝黑色沉淀,是蓝黑墨水的原料。
高效液相色谱法(HPLC)是检测没食子酸含量的常用方法。
色谱条件:反相C18色谱柱,柱温25℃;以甲醇和0.5%的磷酸为流动相,流速0.8-1ml/min,进样量10-20ul;紫外检测器,波长273nm。确保具有良好的线性关系和回收率,标准偏差在规定的范围内。 样品制备:精密称量样品1g,置于50ml容量瓶中,加入30ml甲醇,超声1h。加入甲醇,定容到刻度,摇匀,过滤。 标准品制备:称取没食子酸标准品2mg,放入50ml容量瓶中,用甲醇定容到刻度,摇匀备用。 标准曲线制作:梯度稀释没食子酸标准品,至少6个点,分别用甲醇定容到刻度,摇匀。以上述的色谱条件,进样到hplc,测定色谱图,记录数据。以浓度为横坐标,峰面积为纵坐标,制作标准曲线,计算回归方程和回收率,确保具有良好的线性关系。 样品测定和计算:在色谱条件下,吸取样品样品溶液10ul,进样测定色谱峰面积。如果浓度过高,先稀释,再进样,确保峰面积在标准曲线范围内。根据回归方程和样品的色谱峰面积,可以计算出样品没食子酸的含量,考虑回收率。