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扫描电镜SEM检测服务

简要描述:扫描电镜SEM检测服务,保护好需要扫描的面并做好标记(如在对面进行剪角处理)。迅速投入电镜固定液室温固定2h,再转移至4°保存。

  • 产品型号:
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2024-03-13
  • 访  问  量:1093
详情介绍

一、扫描电镜SEM检测服务的制样步骤:

(1)取材固定:新鲜组织确定取材部位,尽量减小牵拉、挫伤与挤压等机械损伤,1-3min内取样,组织块面积不超过3mm2,用PBS轻轻漂洗将样本表面的血污,毛发等去掉,保护好需要扫描的面并做好标记(如在对面进行剪角处理)。迅速投入电镜固定液室温固定2h,再转移至4°保存。

(2)贴壁细胞:贴壁于盖玻片的细胞培养处理完成后弃培养基,用PBS轻轻漂洗后,弃PBS加电镜固定液室温固定2h,再转移至4°保存。注意保护好扫描面避免剧烈震荡细胞脱落。

(3)后固定:固定好的样品经0.1M磷酸缓冲液PB(PH7.4)漂洗3次,每次15min。0.1M磷酸缓冲液PB(PH7.4)配制1%锇酸室温避光固定1-2h。0.1M磷酸缓冲液PB(PH7.4)漂洗3次,每次15min。

(4)脱水:组织依次入30%-50%-70%-80%-90%-95%-100%-100%酒精每次15min,乙酸异戊酯 15min。

(5)干燥:将样本放入临界点干燥仪内进行干燥。(干燥的样品及无机材料不需要以上步骤)


(6)样本导电处理:将样本紧贴于导电碳膜双面胶上放入离子溅射仪样品台上进行喷金30s左右。

(7)扫描电子显微镜下观察采图。

二、扫描电镜SEM检测服务样本准备方法及要求:
1、动植物组织样本:
① 1-3min内取样,组织块不超过3mm2,用PBS轻轻漂洗将样本表面的血污,毛发等去掉,将需要扫描的面做好标记(如在对面进行剪角处理)。

② 取材时一定注意避免镊子挤压等机械损伤,刀片要锋利避免挫伤组织。尤其是注意保护扫描面。

③ 组织取下后立即投入电镜固定液内室温固定2h,再转移至4℃保存,4℃冰袋运输,在保存和运输过程中固定液切勿冷冻结冰。

④ 植物样本放入固定液后需抽气沉底。

2、细胞样本:
贴壁细胞:贴壁于盖玻片的细胞培养处理完成后弃培养基,用PBS轻轻漂洗后,弃PBS加电镜固定液室温固定2h,再转移至4℃保存,4℃冰袋运输,在保存和运输过程中固定液切勿冷冻结冰。

悬浮细胞:离心收集细胞要肉眼可见细胞沉淀芝麻至绿豆大小,弃培养基后用PBS轻轻漂洗后,弃PBS加电镜固定液并将细胞吹打开悬浮于固定液内室温固定2h,再转移至4℃保存,4℃冰袋运输,在保存和运输过程中固定液切勿冷冻结冰。

3、细菌样本:
长于固体培养基的细菌:连带着培养基切下不超过3mm2组织块,有细菌的一面作为扫描面,放于电镜固定液内室温固定2h,再转移至4℃保存, 4℃冰袋运输,在保存和运输过程中固定液切勿冷冻结冰。

悬浮细菌孢子等:离心收集细菌要肉眼可见细菌沉淀芝麻至绿豆大小,弃培养基后用PBS轻轻漂洗后,弃PBS加电镜固定液并将细菌吹打开悬浮于固定液内室温固定2h,再转移至4℃保存,4℃冰袋运输,在保存和运输过程中固定液切勿冷冻结冰。

4、其他如粉末状材料:
直接准备干燥的粉剂。带有磁性的金属材料(铁,钴,镍等)不能做扫描电镜。



 

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