脱落酸（ABA）含量检测液相哪家好？

核心生理功能

1.生长发育调控

• 种子休眠与萌发：

◦ 种子发育后期ABA含量升高（可达100-500 ng/g FW），诱导LEA蛋白（Late Embryogenesis Abundant Protein）表达，维持种子脱水耐性

◦ 萌发过程中ABA降解酶（CYP707A家族）活性增强，ABA含量降至10-50 ng/g FW，GA/ABA比值升高打破休眠

• 器官脱落与衰老：

◦ 促进离层细胞形成，加速叶片、花器官脱落（与乙烯协同作用）

◦ 上调叶绿素降解基因（如SGR）和膜脂过氧化相关酶活性，促进叶片衰老

2. 逆境响应调控

• 干旱胁迫：

◦ 根系感知干旱信号后合成ABA（1-2小时内增加5-10倍），通过木质部运输至叶片

◦ 诱导气孔保卫细胞中K⁺外流和阴离子通道开放，气孔导度降低40%-60%，减少蒸腾失水

• 盐胁迫：

◦ 激活液泡膜H⁺-PPase和Na⁺/H⁺逆向转运蛋白，促进Na⁺区隔化（根系ABA含量与耐盐性正相关，相关系数r=0.82）

• 低温胁迫：

◦ 诱导COR（Cold-Regulated）基因表达，提高细胞膜不饱和脂肪酸比例（拟南芥aba2突变体低温半致死温度比野生型高4-6℃）

3.代谢调控网络

ABA生物合成主要存在两条途径：

1. 类胡萝卜素途径（质体途径，主要途径）：

◦ 前体：紫黄质（Violaxanthin）经9-顺式环氧类胡萝卜素双加氧酶（NCED）裂解生成黄质醛

◦ 关键限速酶：NCED（干旱胁迫下表达量上调10-20倍）和ABA醛氧化酶（AAO）

2. C15直接途径（细胞质途径，次要途径）：

◦ 法尼基焦磷酸（FPP）经系列酶促反应生成ABA，主要存在于真菌和某些藻类中

ABA失活主要通过：

• 羟基化：CYP707A催化6'-羟基化生成红花菜豆酸（PA），进一步糖基化形成ABA-GE储存于液泡

• 结合失活：与葡萄糖结合生成ABA葡萄糖酯（ABA-GE），在β-葡萄糖苷酶作用下可重新激活

液相检测

1.样品前处理方法

植物样品采集与保存

• 采样规范：

◦ 叶片：选取功能叶（如倒三叶），避开主脉，液氮速冻（采样至速冻间隔<30秒）

◦ 种子：去壳后取胚乳/胚，研磨过100目筛

◦ 保存条件：-80℃超低温冰箱保存（避免反复冻融，建议分装保存）

• 样品量要求：鲜重50-200 mg（叶片）或干重10-50 mg（种子），ABA含量极低样品（如萌发早期种子）需增加至500 mg

2.提取与净化流程

茁彩生物优化的改良甲醇-水提取法（图2）：

1. 提取：

◦ 样品加入5 mL预冷提取液（甲醇:水:乙酸=80:19:1，含100 ng D6-ABA内标）

◦ 冰浴超声30分钟（功率300W，工作3秒/间歇5秒）

◦ 4℃避光静置12小时，12000 rpm离心15分钟取上清

2. 固相萃取净化：

◦ 上清经Sep-Pak C18固相萃取柱（500 mg/6 mL）净化

◦ 依次用5 mL水、5 mL5%甲醇水溶液洗脱杂质

◦ 5 mL甲醇洗脱目标物，40℃氮气吹干

3. 复溶：

◦ 残渣用200 μL流动相（甲醇:0.1%乙酸水=40:60）复溶

◦ 0.22 μm有机相滤膜过滤，进样10 μL分析

不同检测技术对比

脱落酸检测在农业中的应用

1.作物抗逆性评价

抗旱品种筛选

• 检测指标：干旱胁迫下叶片ABA积累速率（ΔABA/Δt）和稳态ABA含量

• 案例：在小麦抗旱育种中，通过测定PEG模拟干旱处理后24小时叶片ABA含量（抗旱品种可达350-450 ng/g FW，敏感品种仅150-200 ng/g FW），结合气孔导度和离体叶片失水率，构建综合抗旱评价体系（准确率提升25%）

2. 盐胁迫响应机制研究

• 检测策略：时空动态分析（根系/叶片、短期/长期胁迫）

• 发现：盐胁迫（200 mM NaCl）下，芦苇根系ABA在2小时内迅速升高（3.2倍），随后通过木质部运输至叶片，诱导叶片Na⁺/H⁺逆向转运蛋白SOS1表达，根系Na⁺外排速率增加40%

3. 作物品质调控

3.1 果实成熟调控

• 应用场景：葡萄无核化栽培中ABA调控

• 技术方案：

◦ 转色期（花后60天）喷施100 μM ABA，促进花色苷合成（含量提高2-3倍）

◦ 通过监测果肉ABA含量（转色前<5 ng/g FW，转色后升至30-50 ng/g FW）确定最佳喷施时期

• 效果：果实可溶性固形物含量提高1.5-2.0 Brix，提前7-10天成熟

4.种子休眠管理

• 检测应用：小麦种子收获前20天测定胚ABA含量，预测休眠程度

• 调控措施：

◦ 高休眠种子（ABA>300 ng/g FW）：赤霉素（GA₃）浸种（200 mg/L）打破休眠

◦ 低休眠种子（ABA<100 ng/g FW）：收获后立即烘干（40℃）防止穗发芽

脱落酸作为植物抗逆信号网络的核心枢纽，其精准检测是解析抗逆机制和实现农业抗逆调控的关键前提。茁彩生物建立的LC-MS/MS检测平台，以其fg级灵敏度和98.7%的准确率，成为ABA研究的可靠技术手段。