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细胞增殖检测——EdU检测法

发布时间: 2024-04-01  点击次数: 144次

细胞增殖是生物体的重要生命特征,指细胞在周期调控因子的作用下,通过DNA复制等反应,完成细胞分裂的过程。增殖检测一般是分析分裂中细胞的数量变化,进而反映细胞的生长状态及活性,目前广泛应用于肿瘤生物学,分子生物学,药代动力学等领域。

细胞增殖检测的方法众多,应用非常广泛,按检测原理主要分为4 类:检测DNA合成、检测代谢活性、检测细胞增殖相关抗原和检测ATP浓度。其中,细胞DNA合成检测是通过测定细胞的DNA合成量来评价细胞的增殖能力,直接测定DNA合成是检测细胞增殖最准确的方法,它是测定物质毒性、评估药物安全评价、判断细胞健康、细胞增殖等研究方向常用方法之一,常用的检测试剂主要是EdU、BrdU等。

实验原理

EdU(5-Ethynyl-2'-deoxyuridine)与BrdU是一种胸腺嘧啶核苷类似物,它们能够在细胞增殖时期代替胸腺嘧啶(T)渗入正在复制的DNA分子,然后分别利用免疫荧光技术、与Apollo荧光染料特异性反应检测细胞增殖情况。

传统的BrdU有一大缺点,就是需要变性DNA后才能与抗体结合,但这就破坏了DNA双链结构,影响了其他染料的结合染色,导致染色弥散,准确性降低等问题。而EdU检测法更简单、更快速、更准确,不需要严苛的样品变性(酸解、热解、酶解)处理,有效地避免了样品损伤,有助于在组织、器官的整体水平上观测细胞增殖的真实情况,具有更高的灵敏度和更快的检测速度。这是一种新型的非放射性同位素细胞增殖检测的方法,在细胞培养、实体组织及临床研究中得到了广泛的应用。该技术可用于细胞成像、流式、细胞示踪、DNA损伤修复检测、线粒体活性检测以及病毒增殖活性检测等。

细胞增值.png




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