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ELISA实验中的ELISA板材质及优势特点

发布时间: 2024-03-05  点击次数: 158次

可用作ELISA板的物质很多,常用的是聚苯乙烯和聚氯乙烯,它们具有较强的吸附蛋白质的性能,抗体或蛋白质抗原吸附其上后保留原来的免疫活性。作为塑料,可制成各种形式。在ELISA测定过程中,它们作为载体和容器,不参与化学反应。加之它们的价格低廉,所以被普遍采用。专用于ELISA测定的产品也称为ELISA板,国际通用的标准板形是8×12的96孔式。

良好的ELISA板应该是吸附性能好,空白值低,孔底透明度高,各板之间和同一板各孔之间性能相近。

①聚苯乙烯ELISA板由于配料的不同和制作工艺的差别,各种产品的质量差异很大。因此每一批号的聚苯乙烯制品在使用前须检查其性能。常用的检查方法为:以一定浓度的人IgG(一般为 10ng/ml)包被 ELISA 板各孔后,每孔内加入适当稀释的酶标抗人IgG抗体,保温后洗涤,加底物显色,终止酶反应后分别测每孔溶液的吸光度。控制反应条件,使各读数在0.8左右。计算所有读数的平均值。所有单个读数与平均读数之差应小于10%。

②另一中是与聚苯乙烯类似的塑料聚氯乙烯。作为ELISA固相载体,聚氯乙烯板的特点为质软板薄,可切割,价廉、但光洁度不如聚苯乙烯板。聚氯乙烯对蛋白质的吸附性能比聚苯乙烯高,但空白值有时也略高。

为比较不同固相在某一ELISA测定中的优劣,可用以下方法加以检验:用其它免疫学测定方法选出一个典型的阳性标本和一个典型的阴性标本。将它们分别进行一系列稀释后,在不同的固相载体上按预定的 ELISA 操作步骤进行测定,然后比较测定结果。在哪一种载体上阳性结果与阴性结果判别最大,这种载体就是这一 ELISA测定的最合适的固相载体。

ELISA 板的特点是可以同时进行大量标本的检测,并可在特定的比色计上迅速读出结果。现在已有多种自动化仪器用于微量反应板型的 ELISA 检测,包括加样、洗涤、保温、比色等步骤,对操作的标准化极为有利。



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