茁彩生物ㅣ走进EdU系列荧光染色

细胞增殖、细胞周期、细胞毒性、DNA复制及修复、信号通路等是测定DNA合成情况研究方向的常用方法之一，用到的检测试剂主要是胸腺嘧啶核苷酸类似物（BrdU 、EdU ），两种试剂在检测方面有一些不同之处。

• BrdU免疫检测需要变性DNA后才能与抗体结合，

• EdU因为其炔羟基团可以与一些荧光染料发生“Click"化学反应，无需变形，从而将细胞标记上荧光，因此应用更广泛。

EdU和Brdu检测区别

Brdu 检测增殖细胞的特点及原理

Brdu(5-bromodeoxyuridine)是一种假核苷酸，它被用来检测细胞增殖。它可以通过与正常DNA碱基结合，从而替换掉正常DNA。Brdu在细胞分裂时被复制到DNA中，并在细胞内存在一段时间，因此它可以用来指示哪些细胞正在增殖。

Brdu检测的基本原理是：在细胞增殖过程中，Brdu会被复制到DNA中，并与DNA碱基结合。这些DNA含有Brdu的细胞可以通过免疫组化或FISH技术被检测出来。

Brdu的检测可以用于研究细胞的生长和分裂，也可以用于检测癌症细胞的增殖和活动。例如，Brdu可以用来检测肿瘤细胞中的DNA损伤，以及化疗药物对肿瘤细胞的作用。

Brdu也可以用于检测免疫系统中的细胞，例如检测T细胞增殖以及抗原激活的活性T细胞。此外，Brdu也可以用来检测神经细胞的发育。

Brdu检测是一种有效的检测细胞增殖的方法，它可以用来研究细胞的生长、分裂和发育，以及肿瘤细胞的活动和化疗药物的作用。

EdU 检测增殖细胞的特点及原理

EdU（５‐ethynyl‐２′‐deoxyuridine，５‐乙炔基‐２′脱氧尿嘧啶核苷）也是一种胸腺嘧啶核苷的类似物，其化学结构特点是脱氧胸腺嘧啶环上与５位C原子相连的甲基被乙炔基取代，在S期细胞增殖时可作为底物掺入到正在复制的DNA链中，

EdU在细胞增殖时能够插入正在复制的DNA分子中，基于EdU与染料的共轭反应可以有效地检测处于S期的细胞百分数。荧光染料可以同EdU发生“Click"化学反应（点击法），从而将增殖的细胞标记上荧光。可用于细胞成像、流式、细胞示踪、DNA损伤修复检测、线粒体活性检测以及病毒增殖活性检测等，EdU亦适用于活体注射，稳定，对活体没有副作用。

与传统的免疫荧光染色(BrdU)检测方法相比，EdU检测法更简单、更快速、更准确，不需要严格的样品变性(酸解、热解、酶解)处理，有效地避免了样品损伤，有助于在组织、器官的整体水平上观测细胞增殖的真实情况，具有更高的灵敏度和更快的检测速度。

EdU和Brdu检测区别见下表

EdU检测的优点：

1、更简单：仅需EdU孵育；无需抗原抗体反应，基于小分子化学反应的检测方法简单高效，反应仅需要几分钟；

2、更灵敏：无需抗体，检测染料仅BrdU抗体的1/500,很容易扩散，即便是单个增殖细胞也能准确检测；

3、更快速：无需过夜，省却了抗原抗体反应的复杂繁琐步骤，只需2.5 h；

4、更准确：无需DNA变性(酸解、热解、酶解等),可有效避免变性带来的样品损伤，确保细胞核边缘清晰完整；

5、更兼容：允许与多种抗体、荧光染料同时标记；对样品几乎无损伤，更容易与多种抗体或荧光蛋白同时标记，能够同时检测细胞其他性状特征；

6、应用性广，细胞成像、流式、细胞示踪、DNA损伤修复检测、病毒增殖活性检测，适用于各种动物细胞检测，对植物细胞亦适用。