无血清细胞冻存液是一种用于保存细胞的液体,它不含血清,但含有一定浓度的糖、盐和蛋白质,以及一定浓度的抗冻剂,可以有效地防止细胞冻伤,通用于各种动物细胞株(肿瘤细胞和常规细胞),冻存细胞可在-80℃长期保存(>5年)。配方成分明确,不含动物来源性蛋白,不含血清,可减少各类细菌、病毒和支原体等污染,保证冻存细胞的安全。该冻存液含DMSO、葡萄糖等各种细胞营养成分,提高细胞存活率和活力,亦适合于无血清培养细胞和蛋白表达细胞。
无血清细胞冻存液对细胞冻存步骤:
1、常规方法收集对数期的贴壁细胞或悬浮细胞于试管中。
2、根据培养细胞的密度和冻存管的大小确定所需冻存细胞数。
3、将所需数目的细胞悬浮液置于离心管中,1000rmp,5分钟离心收集培养细胞沉淀,弃去离心管中的上清液。
4、加入适量的细胞冻存液于离心管中,使细胞浓度约为5×105-1×107/ml。轻柔地混匀细胞,制成细胞混合液。
5、将离心管中的细胞混合液分装于已标记的冻存管中,建议每管1ml或1.5ml。
6、直接将分装好的细胞冻存管放入-80℃超低温冰箱中,可长期冷冻保存。
7、如果想液氮中长期保存,需先放入-80℃冰箱至少一天时间,方可移至液氮罐中保存。
无血清细胞冻存液用途如下:
1、用于造血干细胞、间充质干细胞等干细胞的储存。
2、用于T淋巴细胞、NK细胞等免疫细胞的存储。
3、用于其他类型哺乳动物细胞的储存。