一、牛白细胞介素1β(IL-1β)ELISA试剂盒
1.1 用途
该试剂盒采用“一步"夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)体外定量检测血清、血浆、组织、细胞或其他相关生物液体中IL-6浓度。
1.2 原理
将目标抗体包被于96孔微孔板中,制成固相载体,向微孔中分别加入标准品或标本,其中的目标连接于固相载体上的抗体结合,然后加入辣根过氧化物酶标记的抗体,将未结合的抗体洗净后再次*洗涤后加入TMB底物显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的目标呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(O.D.值),计算样品浓度。
二、牛白细胞介素1β(IL-1β)ELISA试剂盒试剂盒组成
2.1 产品保存
▲未开封试剂盒,4℃保存;已开封,标准品-20℃保存,酶标板加干燥剂后密封-20℃保存,其他4℃保存。
2.2 产品组成表
三、常见问题
3.1 影响ELISA试剂盒曲线的因素
标准曲线做的好与坏会直接影响到实验的结果,甚至是关系到实验的成败。我公司技术人员在处理售后的问题中,有不少科研朋友咨询曲线的问题。
下面小编将影响ELISA试剂盒曲线问题的原因做了总结:
一 OD值不正常的可能原因是:
1、试剂盒未回温,试剂盒回温到25℃;
2、温度控制不好,控制正确温度;
3、孵育时间不准确,控制孵育时间;
4、洗涤时冲击力太大、浸泡时间过长、洗涤次数增 加,洗涤4-5次,每孔250ul,然后拍干;
5、阳光直射,对着风直接吹,避风避光;
6、酶标仪的波长错误,酶标仪的波长450nm;
7、抗体的稀释错误,正确的稀释抗体;
8、水质问题,用娃哈哈矿泉水代替。
二 白板的可能原因是:
1、洗涤液配制错误,正确的配制洗涤液;
2、少加液体(错加液体),正确的步骤加液体。
三 无梯度可能原因是:
1、标准品也污染,换标准品点板;
2、OD值不正常,控制温度时间在做一次;
3、人为点板,不要点板。
四 线性不好可能原因是:
OD值不正常,控制温度时间在做一次。